PCR näme we näme üçin möhüm?

PCR ýa-da polimeraza zynjyr reaksiýasy, DNK yzygiderliligini güýçlendirmek üçin ulanylýan usul.Ilkinji gezek 1980-nji ýyllarda döreden işi üçin 1993-nji ýylda himiýa boýunça Nobel baýragyna eýe bolan Kary Mullis tarapyndan işlenip düzüldi.PCR molekulýar biologiýany özgertdi, gözlegçilere ownuk nusgalardan DNK-ny güýçlendirip we jikme-jik öwrenmäge mümkinçilik berdi.

PCR termiki welosipedde bolup geçýän üç basgançakly proses, reaksiýa garyndysynyň temperaturasyny çalt üýtgedip bilýän maşyn.Üç ädim denaturasiýa, garyşdyrmak we giňeltmekdir.
 
Ilkinji ädimde denaturasiýa, iki hatar DNK ýokary temperaturada (köplenç 95 ° C töweregi) gyzdyrylýar we iki ýüpi birleşdirýän wodorod baglanyşyklaryny döwýär.Bu iki hatar DNK molekulasyna getirýär.
 
Ikinji ädimde, ýelmeşip, temperatura 55 ° C töweregi peselýär we primerleriň bir hatar DNK-da goşmaça yzygiderlilige goşulmagyna mümkinçilik berýär.Astarlar, DNK-nyň gyzyklanma yzygiderliligine laýyk gelýän gysga DNK bölekleri.
 
Üçünji ädimde, uzaldylanda, tak polimeraza (DNK polimerazynyň bir görnüşi) primerlerden täze DNK sintez etmek üçin temperatura 72 ° C töweregi ýokarlanýar.Taq polimeraza gyzgyn çeşmelerde ýaşaýan we PCR-de ulanylýan ýokary temperatura garşy durup bilýän bakteriýadan alnan.

PCR-iň bir siklinden soň, maksat maksatly DNK yzygiderliliginiň iki nusgasy.Birnäçe sikl üçin (adatça 30-40) üç ädim gaýtalamak bilen, maksatly DNK yzygiderliliginiň nusgalarynyň sany çalt artyp biler.Bu, hatda başlangyç DNK-nyň millionlarça ýa-da milliardlarça nusgasyny öndürmek üçin güýçlendirilip bilinjekdigini aňladýar.

 
PCR gözleg we anyklaýyş işlerinde köp sanly amaly bar.Genetikada genleriň we mutasiýalaryň işini öwrenmek üçin, DNK subutnamalaryny seljermek üçin, patogenleriň bardygyny anyklamak üçin ýokanç kesel diagnozynda we düwünçegiň genetiki bozulmalaryny barlamak üçin prenatal diagnozda ulanylýar.
 
PCR, şeýle hem DNK mukdaryny ölçemäge we RNK yzygiderliligini güýçlendirmek üçin ulanyp boljak PCR (RT-PCR) tersine transkripsiýa PCR (RT-PCR) ýaly birnäçe üýtgeşiklikde ulanmak üçin uýgunlaşdyryldy.

Köp programmalaryna garamazdan, PCR-de çäklendirmeler bar.Maksatlaýyn yzygiderliligi we degişli desgalaryň dizaýnyny bilmegi talap edýär we reaksiýa şertleri dogry optimallaşdyrylmasa ýalňyşlyga sezewar bolup biler.Şeýle-de bolsa, seresaply synag dizaýny we ýerine ýetirilmegi bilen PCR molekulýar biologiýada iň güýçli gurallaryň biri bolmagynda galýar.